ELISA试剂盒不可忽略的细节问题

ELISA试剂盒不可忽略的细节问题

ELISA试剂盒又称为酶联免疫试剂盒，酶的高效催化性与抗原抗体的特异性相结合的一门技术。

检测原理：ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因为ELISA试剂盒价格低廉且准确性搞、反应时间短等优点，所以适合大批量的检测，一般常常用于食品安全检测方面。

检测方法ELISA方法是一种特异、敏感的检测方法，可分为： 间接竞争抑制法、抗体/抗原包被直接竞争法。

检测产品

适用于真菌毒素检测、兽药残留检测、疫病抗体检测等。

操作原理：

ELISA的操作步骤：样品收集保存、试剂准备、洗板、加样、加酶标抗体、孵育、显色反应、终止反应、结果判定。

实验过程溶液配制：容器、溶剂、药品

样品处理：仪器、耗材

检测过程：时间、温度

结果分析：软件

注意事项：

样本处理过程：均质

溶液配制过程：稀释

前处理过程：称样、涡动、离心、取上清

检测过程：加样、洗板、温度及时间

分析过程：稀释系数、浓度单位

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种试剂。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔孵育的时间一样。

8． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行操作。

ELISA试剂盒需要遵循的3个要点：

1.抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并保持其免疫学活性;

2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;

3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与样本中相应抗原或抗体的量成比例关系的，可根据已知浓度标准物质的吸光度值绘制标准曲线，并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。